Стельность коров. Исследования. Метод ИФА

Для ранней диагностики стельности коров голштино-фризской породы использовали метод иммуноферментного анализа фирмы IDEXX, основанный на обнаружения белков, ассоциированных со стельностью. Использование данного теста позволяет достоверно диагностировать беременность на 20-28-й день после осеменения коров.

В современном животноводстве остро стоит проблема воспроизводства молочного стада коров. Это обусловлено многими факторами, в частности ранней выбраковкой животных по причинам низкой молочной продуктивности, гинекологическим болезням, болезням дистального отдела конечностей, а также заболеваниям молочной железы.

В настоящее время самыми быстрыми и достоверными из лабораторных способов диагностики беременности КРС являются методы иммуноферментного анализа (ИФА). Тесты на их основе позволяют определять маркеры стельности, такие как видонеспецифический гормон прогестерон или гликопротеины, ассоциированных с беременностью, в молоке и/или сыворотке крови уже на 28 сутки после осеменения.

В мировой практике существует большой выбор тестсистем ИФА, как для количественного, так и для полуколичественного определения прогестерона в лабораторных условиях, а также их более простые варианты для использования непосредственно в хозяйствах

Однако существуют определенные проблемы в получении адекватного результата, сопоставимого с реальным физиологическим состоянием осемененной коровы, при использовании наборов ИФА на основе прогестерона. Причиной тому является нарушение функционального состояния яичников КРС различной этиологии, вариации в уровнях прогестерона, а так же использование программ стимуляции животных с применением прогестеронсодержащих препаратов.

В связи с этим применение прогестеронового теста ИФА для ранней диагностики стельности требует неоднократного тестирования животного для получения относительно достоверного диагноза.

Известны другие различные методы определения стельности, в том числе ректальный, УЗИ-диагностика, гормональный (по концентрации прогестерона, эстронсульфата, хорионического гонадотропина) и др., каждый из которых имеет свои достоинства и недостатки.

Новым направлением в ранней диагностике стельности коров методом ИФА является использование тестов, определяющих в качестве маркера гликопротеины, ассоциированные со стельностью. Данные белки начинают продуцироваться с первого дня формирования ранней плаценты, производятся ею в течение всего периода стельности и в лабораторных исследованиях позволяют исключать получение ложноположительных и/или ложноотрицательных результатов.

Различные разновидности тестов ИФА, на основе белков ассоциированных со стельностью, в ряде зарубежных стран конкурируют с наиболее распространенным методом диагностики стельности - ректальным методом, который позволяет установить наличие плода достаточно точно лишь только через 2 - 3 месяца после осеменения. Раньше этого времени стельность достаточно точно может установить только опытный ветеринарный врач. Следует отметить, что ректальный метод диагностики не является безопасным, и может служить механизмом переноса инфекционных заболеваний от коровы к корове.

Более того, наборы ИФА на основе белков стельности производства IDEXX, серии Pregnancy Test, становятся альтернативой и/или хорошим дополнением метода ранней диагностики стельности с помощью аппарата ультразвукового исследования (УЗИ), т. к. позволяют точно выявлять стельных коров уже на 28 сут. после осеменения с достоверностью получаемых результатов 99,5 %.

Однако, оценивая реальное положение дел в скотоводческих хозяйствах с различной производственной интенсивностью, становится очевидным, что далеко не каждое хозяйство может позволить покупку достаточно дорогого аппарата УЗИ.

Цель исследования

  • Изучить эффективность применения набора ИФА - IDEXX Visual Pregnancy Test при ранней диагностики стельности коров на 20 и 35 сут. после осеменения.

Материалы и методы исследования

  • Для ранней диагностики стельности использовали пробы сыворотки крови в количестве 96 образцов, полученные от коров голштино-фризской породы, на 20 сут. (ООО "ЗапСибХлебИсеть", ООО «Приисетье», АО "Эвика-Агро") и 35 сут. (СПК "Пушкинское") после их осеменения. 

При этом в СПК "Пушкинское" не практикуется применение гормональной стимуляции коров после отела для синхронизации полового цикла.

Коровы, принадлежащие ООО "ЗапСибХлеб-Исеть", по технологическому циклу подвергаются синхронизации половой охоты с использованием классической схемы Овсинг. 

Все животные после отела в ООО «Приисетье» и АО "Эвика-Агро" для активизации половых циклов проходят гормональную обработку по схеме Прессинг и Овсинг.

Сыворотки крови тестировали с помощью набора IDEXX Visual Pregnancy Test согласно инструкции по применению от производителя, с той лишь разницей, что в хозяйствах, в которых используется синхронизация половой охоты отбор проб крови проводили уже на 20 сут. после осеменения коров.

 Дополнительно контроль беременности всех обследованных коров в хозяйствах осуществляли методом УЗИ на 35 сут. после их осеменения вне зависимости от результатов ИФА.

Результаты исследований и обсуждение

Тестирование сывороток крови набором IDEXX Visual Pregnancy Test в СПК "Пушкинское" показало, что из 25 голов КРС взятых в опыт, в числе которых согласно протоколу исследования УЗИ 11 голов были стельными и 14 коров не стельными, беременными оказались 13 голов коров и 12 голов — не беременными. При этом по результатам теста ИФА 2 головы, давших отрицательный результат в УЗИ, и 1 голова, показавшая положительный результат в УЗИ, показали наличие у них стельности и ее отсутствие, соответственно. 

Портовое обследование этих сомнительных животных на 45 сут. стельности методом УЗИ подтвердило правильность результатов, полученных путем тестирования сывороток крови набором IDEXX Visual Pregnancy Test. 

Вероятнее всего, данное разночтение в результатах было обусловлено квалификацией специалиста, проводившего УЗИ. Однако, при получении подобных результатов УЗИ и с возможной последующей гормональной терапией коров имела бы место стопроцентная вероятность получения двух абортов и удлинение сервис-периода по одной корове с ложно положительной стельностью по результатам УЗИ.

Последующие исследования проводились в хозяйствах, где активно используется гормональная синхронизация половой охоты у коров.

Так исследование 25 проб сывороток крови коров в ООО «Приисетье» методом ИФА, определяющего гликопротеины ассоциированные со стельностью, свидетельствовало о наличие таковой у 13 голов. Остальные 12 голов оказались нестельными, что полностью согласуется с результатами УЗИ, проведенным на 35 сут. после осеменения. В ООО "ЗапСибХлеб-Исеть" из 25 обследованных голов методом ИФА 16 голов коров дали положительный результат, а 8 голов - отрицательный результат. Также 1 голова показала слабое окрашивание раствора в лунке, что поставило под сомнение ее стельность.

На 35 сут. была проведена диагностика методом УЗИ, которая подтвердила в 100 % случаев ранее полученные положительные и отрицательные результаты в ИФА.

При этом у коровы с сомнительным результатом на стельность в ИФА (слабое голубое окрашивание раствора в лунке), по результатам УЗИ было обнаружено наличие слабо развитого плодного пузыря, что говорило о стельности этой коровы. Последующее ректальное исследование этой головы на 60 сутки после осеменения показало, что у коровы все же происходит развитие плода, но с выраженной задержкой.

Анализ  заведомо отрицательных по стельности сывороток крови, проведенный в АО "Эвика-Агро" с помощью набора IDEXX Visual Pregnancy Test, продемонстрировал абсолютную специфичность данного теста, т. е. все заведомо нестельные животные дали отрицательный результат. 

Из 14 опытных коров в этом предприятии 8 голов показали наличие плода и 6 голов оказались нестельными. Последующее исследование этих опытных животных методом УЗИ на предмет стельности на 35 сут. после осеменения показало 100 % чувствительность анализируемого метода ИФА, т. е. подтвердило ранее полученные в ИФА IDEXX результаты исследования. 

Заключение

IDEXX Visual Pregnancy Test, как метод ИФА диагностики стельности животных, можно применять в хозяйствах для раннего определения наличия плода у коров. В данных опытах была продемонстрирована возможность выявления не стельных и стельных животных по сыворотке крови, начиная с 20 сут. после осеменения животных. Данный метод диагностики является безопасным для коров, так как не происходит механического вмешательства, беспокойства, возможной передачи инфекции и травмирования плодного пузыря в матке животного.

Метод диагностики стельности с помощью теста IDEXX Visual Pregnancy Test можно применять непосредственно в хозяйствах, так как он не требует специальных лабораторных условий, какого-либо дополнительного  оборудования и персонала и включает в состав набора все компоненты, необходимые для проведения тестов.

Такой метод исследования животных на стельность можно практиковать в хозяйствах, где используются программы прессинг и/или овсинг, а также в хозяйствах, не использующих программы синхронизации половой охоты.

Ранняя диагностика стельности коров вышеуказанным тестом позволяет сократить срок сервис-периода и раньше приступить к лечению животных с нарушениями репродуктивной функции, а также выявлять внутриутробную гибель эмбрионов и плодов на ранних сроках беременности.

Необходимо также обратить внимание на рекомендацию компании-производителя - проводить исследование животных начиная с 28го дня после осеменения.

ЛИТЕРАТУРА: 

  • Сковородин Е. Н. Игуменова Н. А. Методы ранней диагностики стельности // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2011. Т.2. №30. С.89-91.
  • Шевелев Н., Матрешина Н., Краснов В. Метод ИФА диагностики бесплодия // Животноводство России. 2008. №1. С. 47-48.
  • Posthuma-Trumpie G.A., van Amerogen A., Korf J., van Berkel W.J.H. Perspectives for on-site monitoring of progesterone // Tr. Biotechnol. 2009. 27:652 – 660.
  • Мордашева Э. Б., Берчанский Д. И. Клиника «Айболит», г. Красногорск.
  • Середин В.А. “Биотехнология воспроизводства в скотоводстве: учебное пособие. - Нальчик: ИЦ ”Эль-Фа”, 2004. - 472 с., ил.
  • Ранняя диагностика стельности коров с использованием ИФА, Самсонова Ж.В., Осипов А.П., Егоров А.М., Рыбина Т.Н., Киреев Н.В. в журнале Ветеринария № 12, с. 46-48.ф
  • Posthuma Trumpie G.A., van Amerongen A., Korf J., van Berkel W.J.H. Perspectives for onsite monitoring of progesterone // Tr. Biotechnol. 2009. 27:652 – 660.
  • Патент EP1141727 A2 (от 20 марта 1998). Early pregnancy diagnosis using pags (pregnancy-associated glycoproteins). The Regents Of The Univ. Of Minnesota.
  • Шевелев Н., Матрешина Н., Краснов В.Метод ИФА в диагностике бесплодия // Животноводство России. 2008. № 1. С. 47,48.
  • Laing J.A., Heap R.B. The concentration of progesterone in the milk of cows during the repro ductive cycle // Br. Vet. J. 1971. 127:19 – 22. 
  • Пащенко Е., Шевцов Ф. Диагностика стельности // Молочное и мясное скотоводство.2008. № 5. С. 28, 29. 
  • «Петритест» (подложка) для определения БГКП

 

Исследования были проведены:

А. А. Жерносенко, канд. ветеринар. наук, доцент кафедры диагностики, внутренних незаразных болезней, фармакологии, хирургии и акушерства, Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина;

А. В. Машнин, канд. ветеринар. наук, региональный представитель компании ООО "ЗИП-И" по Уралу, Сибири и Дальнему Востоку;

К. И. Петров, аспирант кафедры диагностики, внутренних незаразных болезней, фармакологии, хирургии и акушерства, Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина;

В. В. Гудков, главный ветеринарный врач СПК «Пушкинское»;

А. В. Плахотин, управляющий молочным комплексом ООО «ЗапСибХлеб Исеть»;

Ф. А. Федоров, главный ветеринарный врач ООО «ЗапСибХлеб-Исеть»;

А. В. Оленьков, главный ветеринарный врач АО «Эвика-Агро»;

С. А. Оржеховская, главный ветеринарный врач ООО «Приисетье».


Если у Вас есть нерешенный вопрос, напишите его нам – apk@hlr.ua, мы найдем на него ответ.

Добавить комментарии:

Вас также может заинтересовать

Органічне виробництво і органічна продукція: що це таке?

Розбираємо поняття. Переваги та недоліка впровадження виробництва органічної продукції та її споживання.