Метод тонкослойной хроматографии (ТСХ)

Определение микотоксина патулина методом ТСХ выполняется согласно ДСТУ 4947:2008 «Фрукти, овочі та продукти їх перероблення. Методи визначення вмісту мікотоксину патуліну» і ДСТУ ISO 8128-2:2014 «Сік яблучний, концентрати соків яблук і напої, що містять сік яблука. Визначання вмісту патуліну. Частина 2. Метод з використанням тонкошарової хроматографії».

Суть метода: экстрагируют патулин в смеси этилацетата и хлороформа (с объемным соотношением 3:2), фильтруют экстракт на силикагелевой колонке и определяют их качественное и количественное соотношение при помощи двухкоординатной тонкослойной хроматографии. Метки устанавливают, используя раствор 3-метил-2-бензотіазолінгідразона (МБТН) гидрохлорида.

Необходимое оборудование и материалы

Хроматографические пластины для тонкослойной хроматографии

Классические пластины для тонкослойной хроматографии на основе силикагеля 60 с добавлением уникального полимерного связующего агента, который позволяет получить очень прочную и твердую поверхность (не трескается, не раздувается и на которой можно даже описать карандашом без риска повредить слой).

Классические ТСХ пластины с силикагелевым сорбентом изготавливаются с основанием на стекле, алюминии и пластике. Гибкие листы материала можно легко разрезать ножницами для проведения дальнейших исследований и анализов. Классические пластины для тонкослойной хроматографии на основе силикагеля имеют толщину слоя 250 мкм (со стеклянным основанием) или 200 мкм (с алюминиевой, пластиковой основой), средний размер частиц силикагеля 10–12 мкм. Такие пластины разработаны на основе силикагеля 60 с диаметром пор 60 Å, объемом пор 0,8 мл/ч и поверхностью 520 м2/ч.

Камеры для тонкослойной хроматографии

Изготавливаются из прочного литого стеклоблока, выдерживающего регулярное использование в течение многих лет. Прозрачные стенки обеспечивают визуальный контроль ТСХ-пластин без помех. Верхняя кромка камеры выравнивается для идеального прилегания крышки, а края скошены и зашлифованы, чтобы не было острых кромок. Дно обрабатывается так, чтобы получить плоскую ровную поверхность.

Проявленная камера для ТСХ (стекольный шкаф с крышкой) из прозрачной толстостенной стеклянной камеры предназначена для установки до пяти пластин ТСХ размером 20 x 20 см и предпочтительно используется для количественного анализа, а также для защищенного хранения пластин.

Аналитические стандарты

Для обеспечения метрологической прослеживаемости результатов измерения необходимым условием является использование стандартных образцов. Для этого стандартные образцы в лабораториях необходимо использовать на всех этапах процесса измерения: при оценке пригодности (валидации) и подтверждении соответствия (верификации) методик, при контроле прецизионности и правильности измерений, в межлабораторных сравнениях, в процессе калибровки и проверки калибровки средств измерительной техники.

Особенности HPC Standards

• Производитель стандартных образцов для хроматографического анализа, аккредитованный по ISO 17034 и ISO 9001
• Немецкое качество
• Каждый стандартный образец поставляется с сертификатом, в котором указаны сроки годности, стабильность, однородность и расширенная неопределенность
• Квалификация CRM подразумевает прослеживаемость к первоначальному стандарту (например, NIST)

С целью стандартизации и обеспечения прослеживаемости результатов исследований методом тонкослойной хроматографии используют еще и оборудование: аппликаторы – для автоматизированного нанесения образцов на пластины, и денситометры – для обработки хроматограмм, компоновки итоговых материалов и списка пиков.