Определение соматических клеток и общего микробного числа методом проточной цитометрии
Суть исследования основывается на выявлении соматических клеток и общего микробного числа в молоке методом флуоресцентно-оптической лазерно-проточной цитометрии. Под действием флуоресцентного красителя клетки в лазерном луче приобретают определенную окраску, которая регистрируется детектором проточного цитометра.
BactoCount IBCm 3.0 - проточный цитометр для анализа молока
BactoCount IBCm 3.0 – самый быстрый счетчик бактерий для высокоточного определения гигиенического качества сырого молока на приемных пунктах молочных заводов в режиме реального времени. Оснащенный революционным цитометром, он дает возможность проводить надежный анализ общего микробного числа и соматических клеток в сыром молоке за 2 минуты, благодаря чему можно быстрее выпускать партии молока.
Преимущества
- Время одного анализа – 2 минуты
- Валидация согласно референсным методам:
- Микробное число – ДСТУ ISO 4833:2006 «Мікробіологія харчових продуктів і кормів для тварин. Горизонтальний метод підрахунку мікроорганізмів»
- Соматические клетки – ДСТУ ISO 13366-1 / IDF 148-1:2014 ««Молоко. Підрахування соматичних клітин. Частина 1. Мікроскопічний (контрольний) метод»
- Подключение к локальной базе данных и удаленный доступ
- Стандартные образцы включены в комплект:
- Стандартные образцы содержимого бактерий SRM (IBC): содержат бактерии, присутствующие в сыром молоке, образец SRM с длительным сроком хранения может быть быстро восстановлен для контроля химии, обработки ультразвуком и оптимальной стандартизации прибора
- Стандартные образцы количества соматических клеток SRM (SCC): калибровочный набор, состоящий из пяти стандартов с длительным сроком хранения, может быть быстро восстановлен для контроля и оптимальной стандартизации инструмента
- Прибор сертифицирован международной организацией ICAR
Технические характеристики
| Показатель | Значение | |
| Тип зразка | Сире молоко | |
| Продуктивність | Результати за 2 хвилини; до 50 аналізів на годину | |
| Диапазон измерения | ||
| Общее микробное число |
Рабочий диапазон: 2–10 000 КУО/мл Диапазон измерения: 5–100 000 КУО/мл |
|
| Соматические клетки | 0–10 000 клеток (kSCC)/мл | |
| Повторяемость | ||
| Общее микробное число |
Диапазон (IBC/mL) 10–50 51–100 101–300 > 300 |
Спецификации Sr ≤ 0,07 log SR ≤ 0,14 log Sr ≤ 0,06 log SR ≤ 0,12 log Sr ≤ 0,05 log SR ≤ 0,10 log Sr ≤ 0,03 log SR ≤ 0,06 log |
| Соматические клетки |
Диапазон(kSCC/mL) 100–300 300–500 > 500 |
Спецификации Cv ≤ 5 % Cv ≤ 3 % Cv ≤ 2 % |
| Масса | 50,4 кг | |
| Габариты(Ш х Г х В) | 68,6 x 43,2 x 55,9 см | |
Принцип определения соматических клеток
- Инкубационный реагент, состоящий из осветительного буфера и флуоресцентного маркера, добавляется в молоко, чтобы проникнуть в соматические клетки и окрасить их ДНК.
- Флуоресцентный маркер быстро и селективно встраивается во все двухцепочечные нуклеиновые кислоты соматических клеток.
- По окончании инкубационного периода часть инкубационной смеси переносят в проточный цитометр, где соматические клетки выравниваются, подвергаются воздействию интенсивного лазерного луча и флуоресцируют.
- Флуоресцентный сигнал собирается оптикой, фильтруется и детектируется с помощью фотоумножителя.
- Интенсивность и высота флуоресцентных импульсов регистрируются и используются в качестве параметров выборки.
Принцип определения общего микробного числа
- Инкубационный реагент, состоящий из осветительного буфера, протеолитического фермента и флуоресцентного маркера, добавляется в молоко для разрушения соматических клеток, растворения жировых шариков и белков, проникновения в бактерии и окрашивания их ДНК.
- Флуоресцентный маркер быстро и избирательно включается во все двухцепочечные нуклеиновые кислоты бактерий.
- Смесь обрабатывается ультразвуком в течение инкубационного периода, чтобы помочь химическому расщеплению частиц, которые не дают разрушить оставшиеся колонии бактерий. Это улучшает обнаружение отдельных бактерий и уменьшает фоновую флуоресценцию.
- После периода инкубации часть инкубационной смеси переносится в проточный цитометр, где бактерии выравниваются, подвергаются воздействию интенсивного лазерного луча и флуоресцируют.
- Флуоресцентный сигнал собирается оптикой, фильтруется и детектируется с помощью фотоумножителя.
- Интенсивность и высота флуоресцентных импульсов регистрируются и используются в качестве параметров выборки.
- Отсортированные импульсы (IBC) затем преобразуются в колониеобразующие единицы (CFU) после применения уравнения преобразования.
