Контроль безопасности воды: инновационные методы

Вода покрывает 70% поверхности Земли и при этом составляет всего лишь 1/1000 ее объема. 97,5% воды в мире является соленой водой, и только 2,5% приходится на пресную – воду, которую может пить человек. Но не вся эта пресная вода пригодна для употребления в пищу или для производства без дополнительной обработки. Если для древнего человека было проблемой найти чистую питьевую воду, то сегодня она свободно течет у нас из кранов.

Безопасная и доступная вода – важный фактор здоровья людей, независимо от того, используется ли она для питья, бытовых нужд, приготовления пищи или рекреационных целей. Но что значит безопасная вода? Вода – источник жизни не только для человека, но и для огромного количества микроорганизмов, которые могут быть вредны. Оценку безопасности и качества питьевой воды проводят по показателям эпидемической безопасности (микробиологические, паразитарные), санитарно-химическим (органолептические, физико-химические, санитарно-токсикологические), а также радиационным показателям.

Микробиология воды и нормативная документация

Микробиологические показатели питьевой воды, которую используют предприятия для создания своей продукции, в Украине регламентируется на законодательном уровне. Основной документ для питьевой воды – это ДCанПіН 2.2.4-171-10 «Гігієнічні вимоги до води питної, призначеної для споживання людиною», утвержденный приказом МЗ Украины от 12.05.2010 г. Кроме этого ниже приведена часть нормативных документов, которые могут использоваться предприятиями:

• Санітарно-мікробіологічний контроль якості питної води: МВ 10.2.1-113- 2005. – затверд. наказом МОЗ України від 03.02.2005 р. №60
• Наказ № 548 от 19.07.2012 «Про затвердження мікробіологічних критеріїв по встановленню показників безпеки харчових продуктів»
• Директива Ради 98/83/ЄС від 03.11.1998 р. «Про якість води, призначеної для споживання людиною», офіційний переклад // Офіційний вісник Європейського Союзу. – 2003. – Режим доступу: http://zakon3.rada.gov.ua/laws/show/994_963/ page2

Методические рекомендации предназначены для применения в лабораториях учреждений и учреждений государственной санитарно-эпидемиологической службы, осуществляющих выборочный контроль за качеством различных типов по микробиологическим показателям, при расследовании причин возникновения эпидосложнений, связанных с водным путем передачи.

Также эти методические рекомендации могут использоваться в лабораториях организаций, аккредитованных в установленном порядке на право проведения контроля безопасности питьевой воды по микробиологическим показателям, и в организациях, осуществляющих производственный контроль питьевой воды и без проведения аккредитации в случае внутреннего контроля.

Методы анализ воды

Сейчас для контроля чистоты воды многие используют классические методы для определения бактерий – метод прямого посева или метод мембранной фильтрации для титра кишечной палочки, например. Но наука не стоит на месте, и сегодня уже существуют более быстрые и простые методах.

Для примера рассмотрим, как определяют титр кишечной палочки методом мембранной фильтрации с помощью наборов Colilert-18 от Idexx Water.

Определение титра кишечной палочки методом мембранных фильтров

Сущность метода заключается в концентрировании бактерий из определенного объема воды на мембранных фильтрах с подращиванием их на среде Эндо при 37 °С, дифференцировании выросших колоний и последующем подсчете количества бактерий группы кишечных палочек в 1 л воды. Такой анализ занимает от 48 часов до 14 дней.

Принцип действия Idexx Water

Компания Idexx разработала и запатентовала свой метод – Defined Substrate Technology (DST), или Технологию определения субстрата. В тесте Colilert-18 для обнаружения Сoliforms и E. coli используются индикаторы питательных веществ ONPG и MUG.

Колиформные бактерии используют свой фермент β-галактозидазу для метаболизма ONPG и изменения его цвета с бесцветного на желтый.

E. coli использует β-глюкуронидазу для метаболизма MUG и создания флуоресценции. Поскольку у большинства неколиформных бактерий эти ферменты отсутствуют, они не могут расти и мешать. Несколько неколиформных бактерий, которые действительно содержат эти ферменты, избирательно подавляются специально разработанной матрицей теста Colilert-18.

ONPG (+) реакция

MUG (+) реакция

Рис. 1. Принцип реакции идентификации

Этот подход отличается от традиционных сред, которые обеспечивают богатую питательными веществами среду, поддерживающую рост как целевых организмов, так и нецелевых. Когда нецелевые объекты растут и имитируют целевые организмы, возникают ложные срабатывания. Рост нецелевых объектов также может подавлять целевые организмы и давать ложноотрицательные результаты в традиционных средах. Чтобы помешать росту нецелевых объектов, традиционные среды часто содержат высокие уровни солей, детергентов или других селективных агентов, которые могут непреднамеренно подавлять целевые организмы и давать дополнительные ложноотрицательные результаты.

DTS-тесты способны на качественный и количественный анализы. Чувствительны к 1 организму/100 мл, эти тесты не требуют подготовки среды, фильтрации и подтверждений – подготовка к анализу занимает менее 1 минуты рабочего времени.

Как проводится анализ с Idexx Water

Качественный анализ

1. Добавьте реагент к пробе воды (100 или 250 мл)

2. Закройте сосуд крышкой и встряхните, чтобы растворить

3. Инкубируйте сосуд при 36 °C (Colilert) от 18 до 22 часов

4. Считайте изменение цвета визуально при нормальном свете

5. Считайте изменение цвета под УФ-лампой

Жёлтый цвет = позитив на Coliforms

Желтый цвет и синяя флуоресценция под УФ-лампой = позитив на E.coli

Количественный анализ

Добавьте реагент в пробу воды

Вылейте образец в Quanti-Tray или Quanti Tray 2000

Загерметизируйте Quanti-Tray или Quanti Tray 2000

Инкубируйте при 36 ° C (Colilert) от 18 до 22 часов

Извлеките Quanti-Tray или Quanti Tray 2000

Подсчитайте положительные лунки (желтый = колиформные бактерии с Colilert)

Подсчитайте флуоресцентные лунки (желтый + флуоресценция = E. coli с Colilert)

Сверьтесь с таблицами MPN, чтобы найти количество положительных лунок и записать в таблицу MPN

Какие микроорганизмы можно определять в воде с помощь тестов от Idexx Water

Название	Colilert 18	Pseudalert	Enterolert	SimPlate	Legiolert
Что определяет	Сoliforms, E. coli	Pseudomonas aeruginosa	Еnterococcus	Общее микробное число	Legionella pneumophila
Нормативные документы	(ISO) 9308-2: 2012 Застосування тестових наборів COLILERT-18 для санітарно-бактеріологічного контролю якості води: МР 10.10.2.1- 137 – 2007. – затверд. наказом МОЗ України від 24.01.2007 № 24	Методика прискореного визначення синьогнійної палички у воді за допомогою тестових наборів PSEUDALERT. – Постанова головного державного санітарного лікаря України від 06.09.2013 р. №19. – Київ, 2013. – 21 с.	Методика прискореного визначення ентерококів у воді за допомогою тестових наборів ENTEROLERT. – Постанова головного державного санітарного лікаря України від 06.09.2013 р. №19. – Київ, 2013. – 21 с.	Наказ N 138 от 14.03.2008 Визначення найбільш вірогідного числа мікроорганізмів у воді з використанням тестів діагностичних Quanti-Disk та SimPlate : МР 10.10.21-155 – 2008. – затверд. наказом МОЗ України від 14.03.2008 №138	Получено подтверждение NF от AFNOR Certification, номер IDX 33/06-06/19, в Украине методика не утверждена
Время на анализ	18 часов	24 часа	24 часа	28 часов	7 дней или 168 часов

Какие преимущества Вы получаете с Idexx Water

1. Стандартизация процесса санитарно-бактериологических исследований воды.
2. Повышение достоверности результатов исследования. Исключение субъективного фактора при оценке результата.
3. Ускорение получения результатов исследований воды.
4. Снижение себестоимости исследований и уровня ручного труда в лабораториях (исключаются материальные и трудозатраты на мойку, подготовку и стерилизацию лабораторной посуды, изготовление, стерилизацию и проверку питательных сред, подготовку проб к исследованию).
5. Экономия на питательных средах.
6. Возможность продолжения исследования для получения изолированных колоний даже при массивном бактериальном загрязнении.

С вопросами обращайтесь к специалистам ХЛР: info@apk.hlr.ua, +380 (67) 218-71-98.