Ферментативный метод определения лактулозы

ДСТУ ISO 11285/IDF 175:201 Молоко. Визначання вмісту лактулози ферментативним методом.

Ферментативный метод позволяет выявить содержание лактулозы в присутствии большого количества лактозы. Метод требует дорогостоящих ферментов и реактивов, он длителен по времени проведения. Это усложняет его использование в производственных условиях.

Суть метода состоит в совместном гидролизе лактозы и лактулозы с использованием ряда ферментов до образования моносахаридов: глюкозы, галактозы и фруктозы и последующее превращение фруктозы под действием НАДФ с образованием НАДФН, который измеряют фотометрически при 340 нм.

Необходимое оборудование:

Спектрофотометр (с длиной волны 340 нм).

Спектрофотометры Ulab предназначены для измерения спектральных коэффициентов пропускания и оптической густоты. Простота конструкции обеспечивает надежность эксплуатации и минимизирует затраты времени на проведение измерений. На спектрофотометре произведена оценка соответствия Техническому регламенту № 94.

Преимущества:

Большой ЖК-монитор (128x64 пикселей). Отображение и сохранение 200 групп данных. Отображает калибровочную кривую и кинетическую кривую
При внезапном выключении питания данные сохраняются
Автоматическая установка длины волны
Отдельное выключение/включение галогенной и дейтериевой ламп (для продления срока службы)
Дополнительное программное обеспечение осуществляет полный контроль спектрофотометром через встроенный USB-порт
Возможное измерение в режимах: количественное, кинетика, сканирование по длине волны и ДНК/Протеин тест
Замена лампы не нарушает настройку оптической системы
Большое кюветное отделение для 5 – 100 мм кювет с дополнительными держателями

Возможные варианты:

Модель	101	102/102UV	108/108UV	S131UV/S261UV
Оптическая система	Однолучевая	Однолучевая	Однолучевая, программируемая	Однолучевая/двухлучевая, сканирующая
Рабочий диапазон длины волн, нм	325 – 1100	325 – 1100/190 – 1100	325 – 1100/190 – 1100	190 – 1100
Спектральная ширина щели, нм	4	4	2	2
Погрешность установки длины волны, нм	± 2	± 1	± 0,5	± 0,5/± 0,3
Повторяемость длины волны, нм	1	0,5	0,2	0,2
Метод установки длины волны	Ручной	Автоматизированный	Автоматизированный	Автоматизированный
Размеры (ДхШхВ)	480x360x160	470x370x180	470x370x180	480x360x160 / 600x450x200
Вес, кг	10	12 / 14	14	16 /20

Также понадобится следующее оборудование: кюветы с толщиной поглотительного слоя 1 см, лабораторные весы 2 класса, термостат, или водяная баня 40 ± 2 ̊С, пипет-дозаторы переменного объема от 0,02 до 10 см³ ± 1% и лабораторная посуда (пипетки).

Из реактивов: сульфат цинка 7-ми водный, гексацианоферрат (II) калия, гидрофосфат натрия, дегидрофосфат натрия, сернокислый натрий, гидроксид натрия, триэтанол гидрохлорид, натрий углекислый, пероксид водорода, октанол-1 дегидрогеназа, каталаза, АТФ, НАДФ.