Сероштан Ольга – специалист группы пищевых технологий отдела экспертов ООО «ХИМЛАБОРРЕАКТИВ»

Быстрые и утвержденные МОЗ микробиологические методы мониторинга воды

Рассмотрим, что определяют и какой нормативной документацией руководствуются. А также сравним методы анализа, детально рассмотрим качественный и количественный экспресс-анализ с американскими Idexx Water, изучим его преимущества.

Смотрите также видео с записью соответствующего вебинара:

Объект исследования

Наш объект исследования это – воды из водоемов, источники – скважины/поверхностные воды (как чистые, так и загрязненные), сточные воды предприятий, грунтовые воды, фасованная и бутилированная вода.

Воду можно контролировать на следующих участках:

Вода, используемая для производства перед началом техпроцесса.
Контроль сточных вод предприятий.
Или входящая вода (водоканал/скважины) для смыва остатков дезинфиктантов.

Нормативная база

Основной документ для питьевой воды: ДCанПіН 171 «Гігієнічні вимоги до води питної, призначеної для споживання людиною».

Для воды, используемой на пищевых предприятиях: Наказ №548 от 19.07.2012 «Про затвердження мікробіологічних критеріїв по встановленню показників безпеки харчових продуктів».

Кто может использовать данное решение?

Для тестов Idexx Water утверждены методические рекомендации. Они носят рекомендательный характер и используются:

В лабораториях различных предприятий для собственного контроля и
СанЭпиднадзором – для контроля качества различных типов вод по микробиологическим показателям

Сравнение методов на примере качественного анализа кишечной палочки методом мембранных фильтров

День первый

Подготовка фильтровального аппарата (+Подготовка мембранных фильтров, если они не одноразовые).
Фильтрование воды. Перенос фильтра пинцетом в чашки Петри со средой.
После этого посевы инкубируют в термостате 18–24 часа при 37 °С.

День второй

По окончании инкубации производят осмотр посевов:
a. Отсутствие микробного роста на фильтрах означает, что можно закончить исследования (18–24 ч) с выдачей отрицательного результата.
b. При обнаружении на фильтре колоний, характерных для кишечных палочек, исследования необходимо продолжать. Из нескольких колоний каждого типа готовят мазки, окрашивают их по Граму, микроскопируют. Отсутствие в мазках грамотрицательных, неспороносных палочек является основанием для прекращения анализа.
При обнаружении в мазке грамотрицательных палочек, морфологически сходных с кишечной, проводят биохимические тесты – это еще 2-3 этапа и от 4 до 28 часов.

Итог: в случае положительного результата анализ длится в 7-8 этапов и от 18 до 72 часов.

Как выглядит анализ с современным Idexx Water?

Помните сухие смеси для напитков Юппи? Тест-системы Idexx Water работают почти так же просто.

Необходимо отобрать пробу воды (100 или 250 мл) в стерильную емкость, добавить сухую реагентику Colilert-18, перемешать до растворения и поставить в инкубатор. И через 18 часов мы имеем результат.

Какие тесты есть у Idexx Water?

Самый востребованный и популярный набор – это Colilert-18 для определения колиформных и Coli
Pseudalert – для определения синегнойной палочки
Enterolert – для определения энтерококков
SimPlate – для общего микробного числа
И Legiolert – для определения легионеллы

Как работают тест-системы Idexx Water?

Рассмотрим на примере Colilert-18.

Colilert – это колориметрический и флуориметрический метод, позволяющий визуализировать действие характерных ферментов из колиформных и E. Coli.

Детектирование результата происходит визуально. Желтый цвет – это позитивный результат на колиформы, а желтая и голубая флуоресценция под УФ-лампой – это позитивный на E. Coli.

Другие тесты имеют схожий принцип.

Как провести качественный анализ с Idexx Water?

Отбираем пробу воды и добавляем к ней реагент, встряхиваем до растворения
Инкубируем емкости: для Colilert-18 это 36 ^оС и от 18 до 22 часов
После считываем результат при дневном свете и под ультрафиолетовой лампой
Через 18 часов мы имеем результат

Как провести количественный анализ с Idexx Water?

Начало такое же, как и для качественного анализа: отбираем пробу воды и добавляем к ней реагент, встряхиваем до растворения
Далее переливаем пробу с реагентом в специальный поддон Quanti-Tray или Quanti Tray Герметизируем поддон и инкубируем
После считываем результат при дневном свете или под ультрафиолетовой лампой. Необходимо подсчитать количество ячеек в поддоне, которые изменили цвет или флуоресцируют
Полученное значение сверяют с таблицей MPN или НВЧ (наиболее вероятное число), которая идет в комплекте, и определяют количество бактерий в исследуемом образце

Какие расходные материалы и оборудование необходимы?

Из расходных материалов для качественного анализа необходимы:

Стерильные емкости и набор реагентов
А из оборудования – УФ-лампа с боксом, инкубатор и автоклав

Для количественного анализа – все, что перечислено выше, плюс одноразовые поддоны Quanti-Tray и герметизатор.

Какие нормативные документы в Украине для Idexx Water?

Ниже представлены все методические рекомендации для Idexx Water, которые приняты в Украине. Утвержденной методики нет только для тест-системы Legiolert для определения легионеллы, но этот метод имеет все валидационные документы в ЕС.

Информация о компании IDEXX Laboratories

Как и все гиганты индустрии в США, IDEXX Laboratories была основана в 90-х годах в Делавере несколькими друзьями. За 30 лет своего существования штат компании вырос в более чем 8500 сотрудников и имеет клиентов в более чем 175 странах.

Главный офис сейчас находится в штате Мэн. А для удобства и быстроты работы в Европе есть свой офис и логистический центр. Все предприятия сертифицированы по стандарту ISO:9001.

Производственные мощности Idexx Water имеют сертификацию стерильных условий работы. Качество их производства – на уровне требований фармацевтической промышленности.

Лаборатории контроля качества также сертифицированы по ISO:17025 и новому стандарту ISO:11133.

Ниже представлены лишь несколько стран, в которых Idexx Water принят на законодательном уровне. Украина здесь также представлена.