Сіроштан Ольга – фахівець групи харчових технологій відділу експертів ТОВ «ХІМЛАБОРРЕАКТИВ»

Швидкі та затверджені МОЗ мікробіологічні методи моніторингу води

Розглянемо, що визначають і якою нормативною документацією вони керуються. А також порівняємо методи аналізу, детально розглянемо якісний і кількісний експрес-аналіз з американськими Idexx Water, вивчимо його переваги.

Дивіться також відео із записом відповідного вебінару:

Об'єкт дослідження

Наш об'єкт дослідження це – води з водойм, джерела – свердловини/поверхневі води (як чисті, так і забруднені), стічні води підприємств, ґрунтові води, фасована і бутильована вода.

Воду можна контролювати на таких ділянках:

Вода, яка використовується для виробництва перед початком техпроцесу.
Контроль стічних вод підприємств.
Вхідна вода (водоканал/свердловини) для змиву залишків дезінфектантів.

Нормативна база

Основний документ для питної води: ДCанПіН 171 «Гігієнічні вимоги до води питної, призначеної для споживання людиною».

Для води, використовуваної на харчових підприємствах: Наказ №548 від 19.07.2012 «Про затвердження мікробіологічних критеріїв по встановленню показників безпеки харчових продуктів».

Хто може використовувати дане рішення?

Для тестів Idexx Water затверджені методичні рекомендації. Вони носять рекомендаційний характер і використовуються:

У лабораторіях різних підприємств для власного контролю і
Санепіднаглядом – для контролю якості різних типів вод за мікробіологічними показниками

Порівняння методів на прикладі якісного аналізу кишкової палички методом мембранних фільтрів

День перший

Підготовка фільтрувального апарату (+Підготовка мембранних фільтрів, якщо вони не одноразові).
Фільтрування води. Перенесення фільтра пінцетом в чашки Петрі із середовищем.
Після цього посіви інкубують в термостаті 18–24 години при 37 °С.

День другий

Після закінчення інкубації проводять огляд посівів:
a. Відсутність росту мікробів на фільтрах означає, що можна завершити дослідження (18–24 год) з видачею негативного результату.
b. При виявленні на фільтрі колоній, характерних для кишкових паличок, дослідження необхідно продовжувати. З декількох колоній кожного типу готують мазки, фарбують їх по Граму, мікроскопують. Відсутність в мазках грамнегативних, неспороносних паличок є підставою для припинення аналізу.
При виявленні в мазку грамнегативних паличок, морфологічно подібних із кишковою, проводять біохімічні тести – це ще 2-3 етапи і від 4 до 28 годин.

Підсумок: у разі позитивного результату аналіз триває в 7-8 етапів і від 18 до 72 годин.

Як виглядає аналіз із сучасним Idexx Water?

Пам'ятаєте сухі суміші для напоїв Юппі? Тест-системи Idexx Water працюють майже так само просто.

Необхідно відібрати пробу води (100 або 250 мл) у стерильну ємність, додати суху реагентику Colilert-18, перемішати до розчинення і поставити в інкубатор. І через 18 годин ми маємо результат.

Які тести є у Idexx Water?

Найбільш затребуваний і популярний набір – це Colilert-18 для визначення коліформних і E. Coli
Pseudalert – для визначення синьогнійної палички
Enterolert – для визначення ентерококів
SimPlate – для загального мікробного числа
И Legiolert – для визначення легіонели

Як працюють тест-системи Idexx Water?

Розглянемо на прикладі Colilert-18.

Colilert – це колориметричний і флуориметричений метод, що дозволяє візуалізувати дію характерних ферментів із коліформних і E. Coli.

Детектування результату відбувається візуально. Жовтий колір – це позитивний результат на коліформи, а жовта і блакитна флуоресценція під УФ-лампою – це позитивний на E. Coli.

Інші тести мають схожий принцип..

Як провести якісний аналіз з Idexx Water?

Відбираємо пробу води і додаємо до неї реагент, струшуємо до розчинення
Інкубуємо ємності: для Colilert-18 це 36 ^оС і від 18 до 22 годин
Після цього зчитуємо результат при денному світлі й під ультрафіолетовою лампою
Через 18 годин отримуємо результат

Як провести кількісний аналіз з Idexx Water?

Початок такий же, як і для якісного аналізу: відбираємо пробу води і додаємо до неї реагент, струшуємо до розчинення
Далі переливаємо пробу з реагентом у спеціальний піддон Quanti-Tray або Quanti Tray 2000. Герметизуємо піддон та інкубуємо
Після цього зчитуємо результат при денному світлі або під ультрафіолетовою лампою. Необхідно підрахувати кількість комірок у піддоні, які змінили колір або флуоресцують
Отримане значення звіряють із таблицею MPN або НВЧ (найбільш ймовірне число), яка йде в комплекті, і визначають кількість бактерій у досліджуваному зразку

Які витратні матеріали та обладнання необхідні?

Із витратних матеріалів для якісного аналізу необхідні:

Стерильні ємності і набір реагентів
А з обладнання –УФ-лампа з боксом, інкубатор і автоклав

Для кількісного аналізу – все, що перераховано вище, плюс одноразові піддони Quanti-Tray і герметизатор.

Які нормативні документи в Україні для Idexx Water?

Нижче представлені всі методичні рекомендації для Idexx Water, які прийняті в Україні. Затвердженої методики немає тільки для тест-системи Legiolert для визначення легіонели, але цей метод має всі валідаційні документи в ЄС.

Інформація про компанію IDEXX Laboratories

Як і всі гіганти індустрії в США, IDEXX Laboratories була заснована в 90-х роках в Делавері декількома друзями. За 30 років свого існування штат компанії виріс у більш ніж 8500 співробітників і має клієнтів у більш ніж 175 країнах.

Головний офіс зараз знаходиться в штаті Мен. А для зручності і швидкості роботи в Європі є свій офіс і логістичний центр. Усі підприємства сертифіковані за стандартом ISO:9001.

Виробничі потужності Idexx Water мають сертифікацію стерильних умов роботи. Якість їхнього виробництва – на рівні вимог фармацевтичної промисловості.

Лабораторії контролю якості також сертифіковані за ISO:17025 і новим стандартом ISO:11133.

Нижче представлені лише кілька країн, у яких Idexx Water прийнятий на законодавчому рівні. Україна тут також представлена.