Визначення соматичних клітин і загального мікробного числа методом проточної цитометрії
Суть дослідження ґрунтується на виявленні соматичних клітин і загального мікробного числа в молоці методом флуоресцентно-оптичної лазерно-проточної цитометрії. Під дією флуоресцентного барвника клітини в лазерному промені набувають певного забарвлення, яке реєструється детектором проточного цитометра.
BactoCount IBCm 3.0 – найшвидший лічильник бактерій для високоточного визначення гігієнічної якості сирого молока на приймальних пунктах молочних заводів у режимі реального часу. Оснащений революційним цитометром, він дає змогу проводити надійний аналіз загального мікробного числа і соматичних клітин у сирому молоці за 2 хвилини, завдяки чому можна швидше випускати партії молока.
- Час одного аналізу – 2 хвилини
- Валідація згідно з референсними методами:
- Мікробне число – ДСТУ ISO 4833:2006 «Мікробіологія харчових продуктів і кормів для тварин. Горизонтальний метод підрахунку мікроорганізмів»
- Соматичні клітини – ДСТУ ISO 13366-1 / IDF 148-1:2014 «Молоко. Підрахування соматичних клітин. Частина 1. Мікроскопічний (контрольний) метод»
- Підключення до локальної бази даних і віддалений доступ
- Стандартні зразки включено до комплекту:
- Стандартні зразки вмісту бактерій SRM (IBC): містять бактерії, присутні в сирому молоці, зразок SRM із тривалим терміном зберігання може бути швидко відновлений для контролю хімії, оброблення ультразвуком і оптимальної стандартизації приладу
- Стандартні зразки кількості соматичних клітин SRM (SCC): калібрувальний набір, що складається з п’яти стандартів із тривалим терміном зберігання, може бути швидко відновлений для контролю й оптимальної стандартизації інструменту
- Прилад сертифіковано міжнародною організацією ICAR
Технічні характеристики
| Показник | Значення | |
| Тип зразка | Сире молоко | |
| Продуктивність | Результати за 2 хвилини; до 50 аналізів на годину | |
| Діапазон вимірювання | ||
| Загальне мікробне число |
Робочий діапазон: 2–10 000 КУО/мл Діапазон вимірювання: 5–100 000 КУО/мл |
|
| Соматичні клітини | 0–10 000 клітин (kSCC)/мл | |
| Повторюваність | ||
| Загальне мікробне число |
Діапазон (IBC/mL) 10–50 51–100 101–300 > 300 |
Специфікації Sr ≤ 0,07 log SR ≤ 0,14 log Sr ≤ 0,06 log SR ≤ 0,12 log Sr ≤ 0,05 log SR ≤ 0,10 log Sr ≤ 0,03 log SR ≤ 0,06 log |
| Соматичні клітини |
Діапазон (kSCC/mL) 100–300 300–500 > 500 |
Специфікації Cv ≤ 5 % Cv ≤ 3 % Cv ≤ 2 % |
| Маса | 50,4 кг | |
| Габарити (Ш х Г х В) | 68,6 x 43,2 x 55,9 см | |
Принцип визначення соматичних клітин
- Інкубаційний реагент, що складається з освітлювального буфера та флуоресцентного маркера, додається до молока, щоб проникнути в соматичні клітини й забарвити їхню ДНК.
- Флуоресцентний маркер швидко й селективно вбудовується в усі дволанцюгові нуклеїнові кислоти соматичних клітин.
- Після закінчення інкубаційного періоду частину інкубаційної суміші переносять у проточний цитометр, де соматичні клітини вирівнюються, піддаються впливу інтенсивного лазерного променя і флуоресціюють.
- Флуоресцентний сигнал збирається оптикою, фільтрується й детектується за допомогою фотопомножувача.
- Інтенсивність і висота флуоресцентних імпульсів реєструються й використовуються як параметри вибірки.
Принцип визначення загального мікробного числа
- Інкубаційний реагент, що складається з освітлювального буфера, протеолітичного ферменту й флуоресцентного маркера, додається до молока для руйнування соматичних клітин, розчинення жирових кульок і білків, проникнення в бактерії та забарвлення їх ДНК.
- Флуоресцентний маркер швидко й вибірково включається в усі дволанцюгові нуклеїнові кислоти бактерій.
- Суміш обробляється ультразвуком протягом інкубаційного періоду, щоб допомогти хімічному розщепленню частинок, які не дають зруйнувати колонії бактерій, що залишилися. Це поліпшує виявлення окремих бактерій і зменшує фонову флуоресценцію.
- Після періоду інкубації частина інкубаційної суміші переноситься в проточний цитометр, де бактерії вирівнюються, піддаються впливу інтенсивного лазерного променя і флуоресціюють.
- Флуоресцентний сигнал збирається оптикою, фільтрується й детектується за допомогою фотопомножувача.
- Інтенсивність і висота флуоресцентних імпульсів реєструються й використовуються як параметри вибірки.
- Відсортовані імпульси (IBC) потім перетворюються в колонієтвірні одиниці (CFU) після застосування рівняння перетворення.
